Uzoq R3 IGF-I(havola:https://ww.bloomtechz.com/sintetic-chemical/peptide/long-r3-igf-i-cas-143045-27-6.html) sintetik polipeptid molekulasi bo'lib, kashfiyot tarixi 1970-yillarda boshlangan. O'sha paytda tadqiqotchilar o'sish va metabolizmni nazorat qilishda endogen insulinga o'xshash o'sish omili-I (IGF-I) ning muhim roliga e'tibor berishni boshladilar va IGF-I ga o'xshash, ammo ko'proq biologik va farmatsevtik molekulyar tuzilmani loyihalashga harakat qilishdi. Qo'llash qiymatiga ega yangi turdagi peptid molekulasi.
1. IGF-I ning kashfiyoti va tadqiqoti:
1950-yillarning boshlarida tadqiqotchilar insulinga o'xshash o'sish omillarining mavjudligi va funktsiyasini o'rganishni boshladilar. 1960-yillarda ba'zi tadqiqot tashkilotlari o'sish gormoni (GH) deb ataladigan hayvonlar zardobidan hujayra ko'payishi va o'sishni rag'batlantiruvchi faolligi bo'lgan yangi turdagi oqsilni ajratib oldilar. Keyinchalik, tadqiqotchilar hayvonlar zardobidan va boshqa to'qimalardan GH bilan chambarchas bog'liq bo'lgan IGF-I deb nomlangan boshqa proteinni topdilar.
IGF-I 70 ta aminokislota qoldig'idan iborat kichik molekulyar oqsil bo'lib, uning tuzilishi inson insuliniga o'xshaydi. IGF-I asosan jigar tomonidan sintezlanadi, u GH ning fiziologik ta'siri bilan chambarchas bog'liq bo'lib, o'z retseptorlari va insulinga o'xshash o'sish omili retseptorlari (IGF-IR) o'rtasidagi o'zaro ta'sir orqali hujayra proliferatsiyasini, differentsiatsiyasini va metabolizmini tartibga solishi mumkin.
1970-yillarda, IGF-I bo'yicha tadqiqotlar chuqurlashgan sari, tadqiqotchilar uning molekulyar tuzilishi va biologik xususiyatlarini o'rganishni boshladilar va yanada qimmatli IGF-I analog molekulasini ishlab chiqishga harakat qilishdi.
2. Uzoq R3 IGF-I ni topish va tadqiq qilish:
1970-yillarning oxiridan 1980-yillarning boshigacha baʼzi tadqiqotchilar IGF-I ning N-terminal ketma-ketligini oʻzgartirishni boshladilar va yanada barqaror molekulyar tuzilishga ega, sintez va foydalanishni osonlashtiradigan IGF-I analogini ishlab chiqdilar. Shu asosda uzoq R3 IGF-I tug'ildi.
Long R3 IGF-I endogen IGF-I ning Gln-Pro-Arg-Gly ketma-ketligini almashtirish uchun arabinosil-Ala-Pro-Ala (Apa) dan foydalanadi, natijada plazmadagi yarimparchalanish davri uzoqroq bo'ladi va osonlikcha bog'lanmaydi va tozalanmaydi. IGF-bog'lovchi oqsil (IGFBP). Bundan tashqari, uzun R3 IGF-I ham C-terminusga 13 ta aminokislotalar ketma-ketligini (jumladan, Arg-Lys-Glu-Gly-Ser) qo'shib, disulfid aloqalari va spiral tuzilmalarni va boshqalarni kiritib, o'zgartirildi. yuqori biologik faollikka ega va farmatsevtikada qo'llanilishi mumkin.
Uzoq R3 IGF-I ni tadqiq qilish va ishlab chiqish jarayonida ba'zi tadqiqotchilar transgenik texnologiya va boshqa vositalar orqali uning ifoda samaradorligini va ishlab chiqarish narxini yaxshilashga harakat qilishdi. Misol uchun, uzoq R3 IGF-I Escherichia coli va xamirturush kabi mikrobial tizimlar tomonidan ifodalangan va kislotali ishlov berish, qarama-qarshi oqim xromatografiyasi va boshqa texnologiyalar bilan tozalangan va ajratilgan va nihoyat yuqori toza uzun R3 IGF-I mahsuloti olingan.
Uzoq davom etgan tadqiqot jarayonida endogen IGF-I ga tuzilishi oʻxshash polipeptid molekulasi boʻlgan va qoʻshimcha 13 ta aminokislotaga ega boʻlgan LONG R3 IGF-I ning maxsus tuzilishiga koʻra, ishlab chiqarish uchun turli sintetik usullar oʻrganilgan. Uzoq R3 IGF-I ni tayyorlash jarayoni asosan quyidagi usullarga ega:
1. Kimyoviy sintez usuli:
Kimyoviy sintez uzoq R3 IGF-I ni tayyorlash uchun eng ko'p qo'llaniladigan usullardan biridir. Uzoq R3 IGF-I ning kimyoviy sintezi IGF-I ning ma'lum aminokislotalar ketma-ketligi va uzoq R3 IGF-I ning N-terminusiga qo'shilgan qo'shimcha 13 ta aminokislotalar ketma-ketligi asosida amalga oshirildi. Sintez aminokislotalarning selektivligi va reaktsiya samaradorligini ta'minlash uchun bir nechta himoya guruhlarini qo'llashni talab qiladi. Odatda, maqsadli aminokislotalarning himoyalangan peptid segmenti birinchi navbatda qattiq fazali sintez orqali tayyorlanadi va keyin suyuq fazali sintez orqali uzoq R3 IGF-I molekulasiga yig'iladi.
2. Biotexnologiya qonuni:
Biotexnologiya usuli asosan rekombinant oqsillarni ifodalash uchun ishlab chiqilgan hujayralardan foydalanadi va gen ketma-ketligi va ekspresyon vektorlarini o'zgartirish orqali LONG R3 IGF-I ni ifodalaydi. Ushbu usulda LONG R3 IGF-I geni gen rekombinatsiyasi texnologiyasi, lentiviral vektor, plazmid vektor va shunga o'xshashlar bilan ifodalash uchun xost hujayrasiga kiritilishi mumkin. Ushbu usul katta miqdorda LONG R3 IGF-I ishlab chiqarishi mumkin, shuningdek vektor va sekretsiya signali ketma-ketligini o'zgartirish orqali uning ifodasi va tozalash effektini optimallashtirishi mumkin.
3. Enzimatik usul:
Enzimatik usul, asosan, keraksiz qo'shimcha mahsulotlardan qochib, LONG R3 IGF-I monomerini olish uchun uzun R3 IGF-I prekursor oqsilini parchalash uchun pepsin va mollyuska mushaklari fermenti kabi maxsus fermentlardan foydalanadi. Ushbu usulda, avvalo, uzun R3 IGF-I prekursor oqsilini o'z ichiga olgan matritsani olish kerak, so'ngra LONG R3 IGF-I ning maqsadli moddasini olish uchun fermentlar va pH nazorati va boshqalarni qo'shish orqali tegishli haroratda reaksiyaga kirishishi kerak.
4. Proteinni o'zgartirish usuli:
Proteinni o'zgartirish usuli, asosan, uzoq R3 IGF-I ta'siriga erishish uchun uni o'zgartirish uchun sintezlangan endogen IGF-I dan foydalanadi. Ushbu usulda endogen IGF-I ning N-terminali odatda uzoq R3 IGF-I ta'siriga ega bo'lishi uchun 13 ta o'ziga xos ketma-ketlikda kiritiladi. Bundan tashqari, uzoq R3 IGF-I ning biologik faolligi va yarim umri C-terminal guruhini o'zgartirish orqali yanada yaxshilanishi mumkin.
Xulosa qilib aytganda, uzoq R3 IGF-I sintez usullari kimyoviy sintez, biotexnologiya, fermentativ va oqsil modifikatsiyasini o'z ichiga oladi va har bir usul o'zining afzalliklari, kamchiliklari va qo'llanish doirasiga ega. Kimyoviy sintez texnologiyasi, genetik muhandislik texnologiyasi va boshqa sohalarning uzluksiz rivojlanishi bilan uzoq R3 IGF-I ni tayyorlash texnologiyasi ham yanada takomillashtiriladi va takomillashtiriladi.