Bromofenol ko'koch sariqdan jigarrang sarg'ish rangdagi kukun; Natriy gidroksid eritmasida oson eriydi, metanol, etanol va benzolda eriydi, suvda ozgina eriydi (taxminan {0}}.4g/100ml) va maksimal yutilish to'lqin uzunligi 422nm. Bu pH ko'rsatkichidir. PH 3,0 ~ 4,6 oralig'ida rang sariqdan ko'kgacha o'zgaradi; Bundan tashqari, odatda elektroforetik indikator bo'yoq sifatida ishlatiladi. Jeldagi elektroforetik migratsiya tezligi nuklein kislota yoki oqsilning kichik molekulalari hududida bo'ladi. Inson gemoglobini va hayvonlarning turli gemoglobinlari (o'zaro ta'sir) o'rtasidagi o'zaro ta'sirni o'rganishda tasodifan aniqlandiki, bromofenol ko'k (BPB) o'zaro elektroforez jarayonida tovuq gemoglobin bilan ham o'zaro ta'sir qilishi mumkin, ammo bu hodisa BPB va kattalar o'rtasida mavjud emas. gemoglobin. BPB gemoglobindan farq qiladi. Bu past molekulyar birikma. Uning gemoglobin bilan o'zaro ta'siri mexanizmdagi gemoglobin o'rtasidagi o'zaro ta'sirdan farq qilishi mumkin.
Bromofenol ko'kni qo'llash misollari quyidagilardir:
1. Vodorod ionini aniqlash uchun fotokimyoviy kompozit sezgir membrana tayyorlandi. Usulning bosqichlari quyidagicha:
1) Birinchidan, 55 g akrilamidni 20-30 ml distillangan suvda eritib oling, filtrlang, so'ngra filtrlangan suyuqlikni xona haroratiga sovutib oling, so'ngra assimilyatsiya filtrini o'tkazing, kristallanishini kuting va tabiiy ravishda quriting, toza akrilamid olish uchun vakuum bilan quriting. ;
2) 10g sof akrilamid, 0.04-0.05g ammoniy persulfat, 0.15-0.25g. N, N metilen akrilamid, 0.01-0, 012 g krezol binafsha va 0.{12}}, 022 g bromofenol koʻk distillangan suvda azot bilan deoksidlanadi va asta-sekin H plyus ionoforga sezgir polimer asosidagi hosil qilish uchun ularni qizdiring. kresol binafsha va bromofenol ko'k bo'yicha;
3) Fotokimyoviy kompozit sezgir plyonka hosil qilish uchun polimerni aylantirish uchun yuqori tezlikda ishlaydigan sentrifuga ishlatiladi. Ixtiro oddiy jarayonga, past narxga va yaxshi javob tezligiga, harorat ko'rsatkichlariga va tayyorlangan sezgir plyonkaning takrorlanishiga ega. U vodorod ionlariga sezgir diapazonni samarali ravishda kengaytirishi mumkin va vodorod ionining fotokimyoviy sensori tanib olishning sezgir qismini ishlab chiqarish uchun ishlatilishi mumkin.
2. Kaltsiy qo'shimcha funktsiyasiga ega bo'lgan murakkab oqsil kukuni tayyorlanadi, u quyidagi xom ashyo va og'irlik fraktsiyalarini o'z ichiga oladi: bodom keki umumiy massaning 30-40 foizini tashkil qiladi; Aseton umumiy massaning 1,5 ~ 2,5 foizini tashkil qiladi; Natriy gidrokarbonat eritmasining umumiy massadagi ulushi 8-15 foizni tashkil qiladi; Xlorid kislotasi umumiy massaning 1,5 ~ 2,5 foizini tashkil qiladi; Bromofenol ko'k umumiy massaning 1,5 ~ 2,5 foizini tashkil etdi; D vitaminining umumiy massadagi ulushi 12-18 foizni tashkil etdi; Kaltsiy glyukonat umumiy massaning 15-20 foizini tashkil qiladi; Etanol umumiy massaning 1,5 ~ 2,5 foizini va distillangan suv umumiy massaning 15 ~ 20 foizini tashkil qiladi. Ixtiro xom ashyo sifatida bodom kekidan foydalanadi, aseton va etanol bilan ekstraktlar oladi, oqsil kukunini tayyorlash uchun filtrlaydi va quritadi va kaltsiy qo'shimchasi sifatida kaltsiy glyukonatdan foydalanadi. Ushbu usul yordamida ishlab chiqarilgan aralash oqsil kukuni nafaqat sezuvchanlik sifatini yaxshilaydi, balki kaltsiy etishmovchiligi bo'lgan o'rta va keksa odamlar uchun mos bo'lgan oqsil va kaltsiy glyukonat bilan birgalikda ishlatilganda foydalanish samarasini sezilarli darajada yaxshilaydi.
3. Quyidagi komponentlarni o'z ichiga olgan sulfoniluriya preparatlarining samaradorligini bashorat qilish uchun to'plam tayyorlang:
(1) qizil qon hujayralari lizati;
(2) Leykotsitlar lizatasi;
(3) Proteinni cho'ktirish eritmasi;
(4) Nuklein kislota saqlash eritmasi;
(5) PCR reaktsiya aralashmasi (tarkibida MgCl2, dNTP, PCR kuchaytiruvchi primer va ichki standart mavjud);
(6) DNK polimeraza;
(7) ijobiy sifat nazorati;
(8) Salbiy nazorat;
(9) Endonukleaz bufer tizimi;
(10) cheklovchi endonukleaza;
(11) PCR suvi;
(12)10 × Elektroforez uchun namuna yuklash buferi: 0,25 foiz bromofenol ko'k, 40 foiz (h/v) saxaroza suvli eritmasi. Ushbu usulda biologik namunalardan genomik DNK ajratib olindi va sulfoniluriya preparatlari samaradorligini bashorat qilish uchun polimeraza zanjiri reaktsiyasini cheklovchi fragment polimorfizmi (PCR-RFLP) tahlili orqali alohida biologik namunalardagi sulfoniluriya retseptorlari genining polimorfizmi aniqlandi.
Sintetik bromofenol ko'k:
1. Muzlik sirka kislotasida fenol qizilni eritib, aralashtirib, muzli sirka kislotasiga brom eritmasini qo'shing, bir necha daqiqa aralashtiramiz, 60 daraja issiq suvga quying, xona haroratiga sovutib, bir kechada qo'ying. Filtrlang, filtr tortini navbatma-navbat muzli sirka kislotasi va benzol bilan yuving va havoda quritib, bromofenol ko'k hosil qiling.
2. Muzlik sirka kislotasida fenol qizilni eritib, qaynash nuqtasiga qadar qizdiring, muzli sirka kislotasida erigan brom eritmasini tomizing, sariq qattiq ajralganda filtrlang, erkin bromni sirka kislotasi bilan yuving va xom mahsulot olish uchun havoda quriting. Muzlik sirka kislotasi yoki aseton va muzli sirka kislotasi aralash erituvchidan sof bromofenol ko'k olish uchun qayta kristallanish uchun foydalaning.
3. Eritma tayyorlash uchun fenol qizil va brom sirka kislotada eritiladi. Birinchidan, fenol qizil sirka kislota eritmasini qaynash nuqtasiga qadar qizdiring, so'ngra asta-sekin aralashtirib, brom sirka kislotasi eritmasini qo'shing: fenol qizil reaksiyasi tugagach va sariq kristallar ajralmaganda, sovutib oling va filtrlang. Kristaldagi erkin bromni oz miqdorda sirka kislotasi bilan yuvib, uni sirka kislota yoki atseton sirka kislotasi bilan qayta kristallab, havoda quritib, sof bromofenol ko‘k rangini oling.