Agaroz kukunic24h38o19 kimyoviy formulali organik moddadir. Bu oq yoki sariq rangli jel zarrasi yoki kukun kabi chiziqli polimer bo'lib, asosiy tuzilishi 1,3 bog'langan - D-galaktoza va 1,4{11}}bog'langan 3,6-endoeter-l-galaktoza navbat bilan bog'langan.
Agar pektin ko'plab kichik molekulalardan tashkil topgan heterojen aralashmadir. Agaroza suvda erishi uchun odatda 90 darajadan yuqori qizdiriladi va harorat 35-40 darajaga tushganda yaxshi yarim qattiq jel hosil qiladi, bu uning asosiy xususiyati va turli xil qo'llanilishining asosidir. Agaroz jelining ishlashi odatda jelning kuchi bilan ifodalanadi. Quvvat qanchalik baland bo'lsa, jelning ishlashi shunchalik yaxshi bo'ladi.
Agaroz kukuniqizil suv o'tlari polisaxaridlaridan olingan bo'lib, uning asosiy komponenti asosan laktoza bo'lib, shundan taxminan 70% agaroza va 30% tarvaqaylab ketgan zanjirli agaroza.
Agaroza chiziqli tuzilishga ega bo'lib, D-galaktoza va 3,6-degidratlangan galaktoza beta-1,4 va alfa-1,3 tomonidan navbatma-navbat hosil bo'lgan takroriy disaxarid birliklari mavjud.
-1 dan tarvaqaylab ketgan agarozni ajratib oling, uchta bog'lanish boshqa zanjirni ajratib turadi. Issiq suv bilan dengiz o'tlaridan olingan moddada taxminan 40% agar mavjud.
Tijorat agar (odatda agar deb ataladi) odatda yupqa choyshablar yoki bo'sh arqonlar shaklida bo'ladi va odatda qutulish mumkin bo'lgan saqich, dori qadoqlash vositasi yoki bakterial madaniyat muhiti sifatida ishlatiladi.
Sof agaroza ko'pincha biokimyoviy laboratoriyalarda, elektroforez, xromatografiya va boshqa usullarda, biomolekulalarni yoki kichik molekulalarni ajratish va tahlil qilish uchun yarim{0}}qattiq tayanch sifatida ishlatiladi.
Agaroza kukunidengiz oʻtlaridan olinadigan polisaxarid boʻlib, agarning asosiy komponenti hisoblanadi. U kashf etilganidan buyon jel hosil qilish qobiliyati, termal barqarorlik, kimyoviy barqarorlik va biomoslashuv kabi noyob jismoniy va kimyoviy xossalari tufayli ko'plab sohalarda keng qo'llanilgan. Quyida uning maqsadi haqida batafsil tushuntirish berilgan:
Biotibbiyot tadqiqotlarida qo'llanilishi
Agaroz gel elektroforezi molekulyar biologiyada eng ko'p qo'llaniladigan ajratish va tahlil usullaridan biridir. Jel elektroforez vositasi sifatida agaroz katta gözeneklerin o'lchami, keng ajratish diapazoni va oddiy operatsiya afzalliklariga ega. Elektroforez jarayonida DNK, RNK yoki oqsil kabi biologik makromolekulalar elektr maydoni ta'sirida agaroz jeli teshiklari orqali o'tadi. Har xil molekulalarning zaryadi, o'lchami va shaklidagi farqlar tufayli ularning jeldagi migratsiya tezligi har xil bo'lib, ajralishga erishiladi.
Agaroz gel elektroforezi genlarni klonlash, gen ekspressiyasini tahlil qilish va gen mutatsiyasini aniqlashda keng qo'llaniladi. Odatda hujayra madaniyatida qo'llab-quvvatlash yoki matritsa sifatida ishlatiladi. Ajoyib biologik muvofiqligi va kimyoviy barqarorligi tufayli agaroza hujayralar uchun barqaror o'sish muhitini ta'minlay oladi. Masalan, yumshoq agar koloniyasini shakllantirish tajribasida agaroza hujayralarning koloniya hosil qilish qobiliyatini aniqlash uchun yarim-qattiq kultura muhitini tayyorlash uchun ishlatiladi, bu hujayralarning malign transformatsiyasi darajasini baholash uchun katta ahamiyatga ega.
Bundan tashqari, agaroz to'qima muhandisligi va regenerativ tibbiyotda foydalanish uchun kompozit iskala materiallarini tayyorlash uchun boshqa biomateriallar bilan birlashtirilishi mumkin. Agaroz gel immunodiffuziya va immunoelektroforezda ham muhim rol o'ynaydi. Ushbu texnologiyalarda agaroz jeli antigen va antikor reaktsiyasi vositasi sifatida aniq yog'ingarchilik chiziqlari yoki halqalarni hosil qilishi mumkin, bu antigen yoki antikorning mavjudligi va kontsentratsiyasini aniqlash va tahlil qilish uchun ishlatilishi mumkin. Agaroz jelining g'ovak hajmi va zaryad xususiyati antigen va antikorning diffuziya tezligiga va bog'lanish samaradorligiga ta'sir qilishi mumkin, shuning uchun eksperimental sharoit agarozning konsentratsiyasi va turini sozlash orqali optimallashtirilishi mumkin.
Molekulyar biologiya tajribalarida qo'llanilishi
Agaroz gel elektroforezi nafaqat DNK va RNKni ajratish uchun, balki ularni tozalashga erishish uchun boshqa texnologiyalar bilan birlashtirilishi mumkin. Masalan, DNK ekstraktsiyasi jarayonida agaroz gel elektroforezi DNKning yaxlitligi va tozaligini aniqlash uchun ishlatilishi mumkin, so'ngra maqsadli DNK segmentini jeldan kesish va tiklash yo'li bilan ajratish mumkin. Ushbu usul qulay foydalanish va yuqori tiklanish tezligining afzalliklariga ega. Nuklein kislotalarni gibridlashtirish tajribalarida agaroz jeli DNK yoki RNK problarini jelga mahkamlash uchun qattiq fazali yordam sifatida ishlatilishi mumkin, so'ngra belgilangan maqsadli nuklein kislota bilan gibridlanadi.
Gibridlanish signallarining mavjudligi va intensivligini aniqlash orqali maqsadli nuklein kislotalarning mavjudligi va kontsentratsiyasini aniqlash mumkin. Agaroz jelining g'ovak o'lchami va zaryad xususiyati prob va maqsadli nuklein kislotaning bog'lanish samaradorligiga ta'sir qilishi mumkin, shuning uchun gibridizatsiya shartlari agaroza konsentratsiyasi va turini sozlash orqali optimallashtirilishi mumkin. Polimeraza zanjiri reaktsiyasi (PCR) DNKni kuchaytirish uchun molekulyar biologiyada eng ko'p qo'llaniladigan usullardan biridir. PCR mahsulotlarini tahlil qilishda agaroz gel elektroforezi eng ko'p qo'llaniladigan usullardan biridir. Elektroforez orqali PCR mahsulotlarini ajratish orqali kuchaytirilgan bo'laklarning o'lchami va tozaligini aniqlash mumkin, shu bilan PCR reaktsiyasi muvaffaqiyatli bo'ladimi yoki -o'ziga xos bo'lmagan kuchaytirish muammolari bor yoki yo'qligini aniqlash mumkin.
Biokimyoviy tahlilda qo'llanilishi
Agaroz jelining gözenek hajmi nisbatan katta bo'lsa-da, u kichik molekulyar oqsillarni ajratish uchun mos emas, lekin u hali ham ba'zi hollarda oqsillarni ajratish va tozalash uchun ishlatilishi mumkin. Misol uchun, preparativ gel elektroforezida agaroz jeli katta molekulyar og'irlikdagi oqsillarni ajratish va tozalash uchun ishlatilishi mumkin.
Bundan tashqari, agaroz boshqa materiallar bilan birlashtirilishi mumkin, uning ajralish oralig'ini kengaytirish va ajratish samaradorligini oshirish uchun kompozit jelni tayyorlash mumkin. Ayrim ferment faolligini aniqlash tajribalarida agaroz gel fermentlarni immobilizatsiya qilish uchun tashuvchi sifatida ishlatilishi mumkin. Fermentning agaroz jelida immobilizatsiyasi fermentning faolligi va barqarorligini saqlab turishi va fermentning reaktivlardan ajralib chiqishi va tiklanishini osonlashtirishi mumkin. Bu usul ferment muhandisligi sohasida keng qo'llaniladi.
Mikrobiologiyada qo'llanilishi
Agaroza odatda mikrobial madaniyat muhitida koagulant sifatida ishlatiladi. Agar bilan solishtirganda, agaroza yuqori tozalik va past nopoklik tarkibiga ega, bu uni mikrobial etishtirish uchun qulayroq qiladi. Qattiq kultura muhitini tayyorlashda agaroza issiq suvda eritiladi, so'ngra boshqa oziq moddalar va antibiotiklar qo'shiladi va qattiq madaniyat muhitini hosil qilish uchun sovutiladi.
Ushbu turdagi madaniyat muhiti mikroorganizmlar uchun barqaror o'sish muhitini ta'minlab, ularni ajratish, tozalash va identifikatsiyalashni osonlashtirishi mumkin. Mikrobiologik identifikatsiyalash tajribalarida agaroz jeli maxsus identifikatsiya muhitini tayyorlash uchun ishlatilishi mumkin. Misol uchun, ichak bakteriyalarini aniqlashda o'ziga xos qandlarni o'z ichiga olgan agaroz madaniyat muhiti, ularning shakar fermentatsiyasini kuzatish orqali har xil turdagi bakteriyalarni ajratish uchun ishlatilishi mumkin. Bundan tashqari, agaroz jeli mikroorganizmlarning metabolik xususiyatlarini va ferment faolligini aniqlash uchun biokimyoviy reaktsiya vositalarini tayyorlash uchun ham ishlatilishi mumkin.
Agaroz ishlab chiqarish jarayonini to'rt qismga bo'lish mumkin: oldindan ishlov berish, ekstraktsiya, DEAE tsellyuloza bilan ishlov berish va suvsizlantirish.
Oldindan ishlov berilgan kukunli xom ashyo to'g'ridan-to'g'ri 80C da 1/2 soat davomida quritiladi. tasma va blokli xom ashyo suv bilan yuviladi, kichik bo'laklarga bo'linadi va pishiriladi.
Ekstraksiya: sirka kislotasi natriy asetat aralash efir eritmasi bilan bir necha soat davomida aralashtirib, ekstraksiya qilingandan so‘ng, so‘rish yo‘li bilan suvni olib tashlang, yuving, so‘ng aralashtirib, natriy karbonat natriy gidrokarbonat bufer eritmasi bilan bir necha soat davomida chiqarib oling, so‘ngra nasos bilan filtrlang va suv bilan yuving.
Bufer eritmasi bilan ekstraksiya qilingan agar jeli suv bilan qizdirish orqali 4% eritmada eritiladi, so'ngra issiqlik saqlanishi ostida 3-4 soat davomida aralashtirish uchun DEAE tsellyuloza qo'shiladi va keyin sentrifugalanadi. Filtrat yig'iladi va kolloid holatda oq eritma olish uchun filtrlanadi.
Suvsizlanish: oq filtratni qizdirgandan so'ng, aniq yog'ingarchilik bo'lgunga qadar aralashtirganda 95% etanolni tez qo'shing, uni xona haroratiga sovutib, yuqori qatlam eritmasini to'kib tashlang, cho'kmani yuving va quriting, mahsulot 71% ni tashkil qiladi.
Reagentni qayta tiklash DEAE tsellyulozani qayta tiklash: santrifüjdan so'ng cho'kma suv bilan qaynatiladi, 100 ko'zli ipak matoda filtrlanadi, filtrat shaffof bo'lguncha bir necha marta takrorlanadi, so'ngra 0,5mol/1 HCI, 0,5mol/1 NaOH va suv bilan yuviladi va quritiladi. Qayta tiklash darajasi 95% ni tashkil qiladi 80 C fraktsiyasi Yichun suvli eritmasidan olingan etanolik suvli eritmani to'g'ridan-to'g'ri distillash orqali to'plangan. Keyin to'yinganlik darajasiga qattiq natriy xlorid qo'shing va distillashda davom eting . 70% zaryadlash mumkin. Shishadagi natriy xlorid bug'langandan so'ng, u vana orqali ham zaryadlanishi mumkin.
Agaroz kukunisuvda erishi uchun odatda 90 darajadan yuqori haroratgacha qizdiriladi. Harorat 35-40 darajaga tushganda, u yaxshi yarim qattiq jel hosil qiladi, bu ham uning asosiy xususiyati va turli maqsadlarda foydalanish uchun asosdir. Agaroz jelining ishlashi odatda jelning kuchi bilan ifodalanadi. Konsentratsiya qanchalik yuqori bo'lsa, jelning ta'siri shunchalik yaxshi bo'ladi. Agaroz jeli vodorod aloqasi mavjudligidan kelib chiqadi. Vodorod aloqasini buzadigan har qanday omil jelning yo'q qilinishiga olib kelishi mumkin. Agaroza gidrofil va zaryadlangan guruhlardan deyarli butunlay xoli. U kamdan-kam hollarda sezgir biomolekulalarga denaturatsiya va adsorbsiyani keltirib chiqaradi. Bu ideal inert tashuvchidir.
Agarozni tayyorlash jarayonida agaroza pektinini iloji boricha olib tashlash kerak, aks holda agarozda ionlangan guruhlar o'rnini bosuvchi juda oz miqdordagi sulfat va piruvat bo'lishi mumkin, bu elektroosmoz (EEO) ga olib kelishi va zarrachalarning harakatiga ta'sir qilishi mumkin. Yuqori sifatli agarozaning sulfat miqdori nisbatan past, odatda 0,2% dan past va elektroosmotik ta'siri nisbatan kichik, odatda 0,13 dan past. Shuning uchun agar agarga qaraganda qimmatroq.
1937 yilda Araki birinchi bo'lib agardan agarni ajratib oldi.
Faqat 1961 yilga kelib, hjertin birinchi marta agarozaning ajoyib xususiyatlarini kashf etdi, bu esa tobora ko'proq e'tiborni tortdi va sanoat ishlab chiqarishini boshladi. Agaroz klinik sinov, biokimyoviy tahlil va biomolekulalarni ajratishda keng qo'llaniladi.
Agaroz kukuni molekulyar biologiya va biotexnologiyada asosiy vositadir. Jel elektroforez, yaqinlik xromatografiyasi, immunodiffuziya, immunoelektroforez va boshqa sohalarda keng qo'llaniladi.
Foydalanish qulayligi, ko‘p funksiyaliligi, past toksikligi va -xarajat samaradorligi kabi noyob xususiyatlari uni laboratoriya tadqiqotlarida ajralmas komponentga aylantiradi.
Cheklangan ruxsat va mo'rtlik cheklovlariga qaramay, agar jel texnologiyasidagi so'nggi yutuqlar, jumladan, yuqori{0}}rezolyutsiyaga ega jel, tayyor jel va agar asosidagi mikrosuyuqlik qurilmalari ularning amaliyligini kengaytirdi va ishlashini yaxshiladi.
Ilmiy tadqiqotlarning uzluksiz rivojlanishi bilan agaroz kukuni, shubhasiz, molekulyar biologiya va biotexnologiya asboblar qutisida qimmatli va muhim reagent bo'lib qoladi.
TSS
Agaroz nima va uning maqsadi nima?
Agaroz gel elektroforezi nuklein kislotalarni ajratishning samarali va samarali usuli ekanligi isbotlangan. Agarozning yuqori jel kuchi katta DNK fragmentlarini ajratish uchun past foizli jellar bilan ishlashga imkon beradi.
Agaroz va agar nima?
Agaroza dengiz o'tlaridan (masalan, qizil suv o'tlari) olingan polisakkarid bo'lib, uning asosiy komponenti poligalaktoza hisoblanadi. Agar agaroza va agar pektin birikmasidan iborat bo'lib, agaroza olish uchun tozalanadi. Agaroza chiziqli polimorf, agar pektin esa ko'plab kichik molekulalarning geterogen aralashmasidir.
Agaroz so'zining ma'nosi nima?
Agaroza dengiz qizil suvoʻtlaridan, xususan Rhodophyceae agarotsitlaridan ekstraksiya qilingan yuqori-molekulyar{1}}polisaxarid boʻlib, biomoslashuvi va termo-qaytariladigan jelleşme xususiyatlari tufayli hujayra tadqiqotlari va gel elektroforezi uchun ideal jellar hosil qiladi.
Agaroz kukunining asosiy maqsadi nima?
Asosan gel elektroforezi uchun ishlatiladigan agaroz jel filtrlash kromatografiyasi va yaqinlikni tozalash kabi boshqa ilovalarga ega. Uning eng keng tarqalgan qo'llanilishi agaroz jellarini tayyorlashda bo'lib, bu erda teshik hajmi agaroz konsentratsiyasiga bog'liq.
Issiq teglar: agaroz kukuni cas 9012-36-6, etkazib beruvchilar, ishlab chiqaruvchilar, zavod, ulgurji, sotib olish, narx, ommaviy, sotuv